Giáo trình Chiết xuất, phân lập một số hợp chất từ lá cây gối hạc - Vũ Đức Lợi

Nội dung text: Giáo trình Chiết xuất, phân lập một số hợp chất từ lá cây gối hạc - Vũ Đức Lợi

1. Tp chí Khoa h c HQGHN: Khoa h c Y D c, T p 32, S 1 (2016) 12-17 Chi t xu t, phân l p m t s h p ch t t lá cây g i h c ( Leea rubra Blume ex Spreng.) V c L i1,* , m Giang Nam 1, ng V n ng 1, Nguy n Th Ph ơ ng 2 1Khoa Y D ượ c, Đại họ c Qu ốc gia Hà Nội, 144 Xuân Th ủy, C ầu Gi ấy, Hà N ội, Vi ệt Nam 2Vi ện D ược liệu, s ố 3B Quang Trung, Hoàn Ki ếm, Hà N ội, Vi ệt Nam Tóm t t T c n chi t ethanol 96% lá cây g i h c ( Leea rubra Blume ex Spreng.) thu hái t i huy n L ng Giang, t nh Bc Giang, n m h p ch t (1-5) ã c phân l p b ng các ph ơ ng pháp s c ký. Các h p ch t này c xác nh là acid gallic (1), acid protocatechuic (2), acid 4-hydroxybenzoic (3), arctiin (4), kaempferol-3-O-α-L- rhamnopyranosyl(1 2)-α-L-arabinofuranosid (5) d a trên các d li u ph th c nghi m và so sánh v i d li u ph ã c công b tr c ây. T t c các h p ch t trên u l n u tiên c phân l p t cây g i h c. Ba h p ch t 2, 4, 5 l n u tiên phân l p c t loài Leea rubra . Trong ó, hai h p ch t 4, 5 l n u tiên c tìm th y trong m t loài thu c chi Leea . Nh n ngày 26 tháng 9 n m 2015, Ch nh s a ngày 07 tháng 11 n m 2015, Ch p nh n ng ngày 25 tháng 3 n m 2016 Từ khóa: Acid gallic, acid protocatechuic, acid 4-hydroxybenzoic, arctiin, kaempferol-3-O-α-L rhamnopyranosyl(1 2)- α-L-arabinofuranosid. 1. t v n * tri n s n ph m t d c li u g i h c tr nh mt yêu c u h t s c c n thi t cp ch. Cho Cây g i c a, c tên khoa h c Leea rubra n nay, mi 2 o o công b s Blume ex Spreng, thu c c s ng r t mt a c flavonoid triterpenoid trong ph bi n iu c b nh v au nh c a i L.rubra [2, 3]. Nh m cung c p thêm xơ ng kh p, tê th p, au ng, rong kinh, yu, thông tin h ng t i c tiêu c nh c mt i sau khi [1]. Mc c s ng t ch t nh tiêu chu n a d c li u g i rng i trong y c c truy n, d c li u g i c, phát tri n s n ph m t cây g i h c, tài c v n ch a c nghiên c u y v c ã chi t xu t phân l p c nh c u c a ng d c ng nh nh ph n a c, dn 05 h p ch t phenolic. ây là nhóm h p ch t n vi c ch a c tiêu chu n ki m nghi m. quan tr ng trong cây g i h c và có các tác d ng nh th , vi c nghiên c u phân l p t sinh h c ng d ng trong phòng và iu tr b nh. ch t, ch ng minh t nh sinh c, xu t tiêu nh ch t l ng d c li u, phát 2. i t ng và ph ơ ng pháp nghiên c u ___ * Tác gi liên h . T.: 84-989313325 2.1. Nguyên li ệu Email: ducloi82@gmail.com 12
2. V. Đ. L ợi và nnk. / Tạp chí Khoa h ọc ĐHQGHN: Khoa h ọc Y D ược, T ập 32, S ố 1 (2016) 12-17 13 Nguyên li u dùng trong nghiên c u là b theo dõi v t các ch t t d ch chi t phân on và ph n lá c a cây gi h c c thu i t i huy n ki m tra tinh khi t các ch t phân l p. Xác nh c u trúc các ch t phân l p Lng Giang, t nh B c Giang vào tháng 12 n m đị ấ ấ ậ Xác nh c u trúc c a các ch t phân l p 2012. M u c xác nh tên khoa h c là Leea c d a trên phân tích k t qu ph h ng ngo i rubra Blume ex Spreng b i TS. Th Xuy n, (IR), ph kh i (MS), ph c ng h ng t h t B môn Th c v t, Khoa Sinh h c, Tr ng i nhân (1H-NMR, 13 C-NMR, DEPT, HMBC, hc Khoa h c T nhiên – i h c Qu c gia Hà HSQC) s d ng ch t n i chu n là TMS Ni. M u nghiên c u hi n c l u gi t i (tetramethyl silan) và so sánh các d li u thu c Khoa Y D c, HQGHN. t th c nghi m v i các d li u ã công b . 2.2. Hóa ch ất, dung môi 2.5. Chi ết xu ất, phân l ập Hóa ch t: b n m ng tráng s n pha th ng Lá g i h c ã ph ơi khô (3,0 kg) c c t silica gel F 254 (Merck), pha o RP 18 F 254s nh , ngâm chi t v i ethanol 96% nhi t (Merck), ch t h p ph silica gel pha th ng (c phòng (chi t 3 l n, m i l n 4 ngày). D ch chi t ht 63-200 m, Merck), pha o RP-18 (30-50 c g p l i và c t lo i c n n c d i áp su t m, Merck), acid sulfuric 10%/ethanol. Dung gi m thu c c n chi t c n ã cô khô (103 g). môi công nghi p n-hexan, ethyl acetat, n- Cn chi t c hòa tan vào n c c t (0,5 lít) butanol, dicloromethan (CH 2Cl 2), methanol thành h n d ch r i l c, chi t phân on l n l t (MeOH), n c c t (H 2O). vi n -hexan (0,5 lít × 3 l n), ethyl acetat (0,5 lít × 3 l n), n-butanol (0,5 lít × 3 l n). Các d ch 2.3. Thi ết b ị, d ụng c ụ chi t n -hexan, ethyl acetat và n-butanol c tách riêng, c t lo i dung môi d i áp su t gi m - Các lo i c t s c ký, èn t ngoi i Vi n thu c các ph n c n t ơ ng ng: c n phân D c li u on n-hexan (20 g), c n phân on ethyl acetat - Máy o ph h ng ngo i (IR) FT-IR (35 g) và c n phân on n-butanol (34 g). C n Spectrophotometer (Perkin Elmer, M) i Vi n phân on EtOAc (35 g) c ch y qua c t s c a c, Vi n n lâm Khoa c Công ký silica gel pha th ng, r a gi i b ng h dung ngh Vi t Nam môi CH 2Cl 2 - MeOH v i t l methanol t ng - Máy o ph kh i Agilent 1100 LC/MSD dn t 0 n 100 % thu c 5 phân on: P1 i Vi n a c, Vi n n lâm Khoa c (4,4 g); P2 (5,6 g); P3 (7,1 g); P4 (4,8 g) Công ngh Vi t Nam và P5 (3,9 g). Phân on P3 (7,1 g) ti p t c - Máy o ph c ng h ng t h t nhân ( 1H- c phân tách b ng c t silica gel pha th ng 13 NMR, C-NMR, DEPT, HSQC, HMBC) Bruker vi h dung môi r a gi i CH 2Cl 2 - MeOH AM500 FT-NMR i Vi n a c, Vi n n (10/1; 8:1; 5/1) thu c 4 phân on ( P3.1 lâm Khoa c Công ngh Vi t Nam n P3.4 ). Phân on P3.2 c a lên c t silica gel pha o RP-18 r a gi i gradient v i 2.4. Ph ươ ng pháp nghiên c ứu h dung môi MeOH/H 2O (0/1; 1/8; 1/6) l n l t thu c ch t s 1 (34 mg) và ch t s 2 (8 mg). Chi t xu t, phân l p các h p ch t Phân on P3.1 c phân tách trên c t silica Chi t xu t các h p ch t t d c li u b ng gel pha o RP-18 r a gi i ng dòng v i h ethanol 96% theo ph ơ ng pháp ngâm nhi t dung môi MeOH/H 2O (1/5) thu c ch t s 3 phòng. Phân on d ch chi t b ng dung môi có (11 mg). Phân on P3.4 c a lên c t phân c c t ng d n n-hexan, ethyl acetat và Sephadex LH-20 s d ng dung môi r a gi i là n -butanol. Phân l p các ch t b ng s c ký c t v i methanol. Ki m tra thành ph n d ch r a gi i các ch t h p ph silica gel pha thng, pha o bng s c ký l p m ng, thu c 4 phân on RP-18, Sephadex. S c ký l p m ng dùng P3.4.1 n P3.4.4 . Phân on P3.4.3 c
3. 14 V. Đ. L ợi và nnk. / Tạp chí Khoa h ọc ĐHQGHN: Khoa h ọc Y Dược, T ập 32, S ố 1 (2016) 12-17 tinh ch trên c t silica gel pha o RP-18 r a 6,83 (1H, dd, J= 2,0; 8,0, H-6’), 5,61 (1H, d, J= gi i gradient v i h dung môi methanol/H 2O 7,0 Hz, H-1’’), 4,15 - 4,50 (5H, H-2’’; H-3’’; (1/2; 1/1) thu c ch t s 4 (15 mg) và ch t s H-4’’; H-5’’; H-6’’), 3,90 – 4,06 (2H, m, H-9), 5 (18 mg). 3,03 (2H, m, H-7’), 2,69 - 2,80 (2H, m, H-7), 2,57 (1H, m, H-8’), 2,53 (1H, m, H-8). Ph 13 C- NMR (C 5D5N; 125 MHz): 132,6 (C-1), 112,7 3. Kt qu và bàn lu n (C-2), 150,3 (C-3), 148,7 (C-4), 114,3 (C-5), 121,2 (C-6), 37,9 (C-7), 41,6 (C-8), 71,3 (C-9), Dữ li ệu ph ổ c ủa các h ợp ch ất: 131,6 (C-1’), 113,2 (C-2’), 150,1 (C-3’), 146,9 Ch t s 1 : Bt màu tr ng. Ph IR (cm -1): (C-4’), 116,4 (C-5’), 122,3 (C-6’), 34,6 (C-7’), 3496; 1667; 1318; 1610; 1541; 1425; 1218. Ph 46,6 (C-8’), 178,9 (C-9’), 102,5 (C-1’’), 74,8 ESI-MS ( m/z )=169 [M-H] -. Ph 1H-NMR (C-2’’), 78,5 (C-3’’), 71,4 (C-4’’), 78,8 (C-5’’), 13 (C 5D5N; 500 MHz) và C-NMR (C 5D5N; 125 62,3 (C-6’’), 60,0 (3-OCH 3), 60,0 (3’-OCH 3), MHz): xem b ng 1. 55,9 (4’-OCH 3). Ch t s 2: B t màu nâu. Ph IR (cm -1): Ch t s 5 : B t vô nh hình màu vàng. Ph -1 3369; 2937; 2859; 1678; 1469; 1417; 1241; IR (cm ): 3402; 2924; 1659; 1614; 1512; 1183; + 1101. Ph ESI-MS ( m/z ) =153 [M-H] -. Ph 1H- 1090. Ph ESI-MS ( m/z ) = 587 [M+Na] . Ph 13 1 NMR (DMSO; 500MHz) và C-NMR (DMSO; H-NMR (CD 3OD; 500 MHz): 6,21 (1H, d, J=2 125 MHz): xem b ng 1. Hz, H-6), 6,41 (1H, br s, H-8), 7,98 (2H, dd, Ch t s 3: B t màu nâu. Ph IR (cm -1): J=2,0; 6,5 Hz, H-2’; H-6’), 6,95 (2H, dd, J=2,0; 3494; 1658; 1266; 1173. Ph ESI-MS 7,0 Hz, H-3’; H-5’), 5,70 (1H, br s, H-1’’), 4,44 - 1 (m/z )=137 [M-H] . Ph H-NMR (CD 3OD; (1H, dd, 1,0; 2,5 Hz, H-2’’), 3,61 (2H, m, H- 13 500MHz) và C-NMR (CD 3OD; 125 MHz): 5’’), 4,97 (1H, d, J=1,5 Hz, H-1’’’), 1,25 (3H, 13 xem b ng 1. d, J=6,0 Hz, H-6’’’). Ph C-NMR (CD 3OD; Ch t s 4: B t vô nh hình màu tr ng. Ph 125 MHz): 158,6 (C-2), 134,8 (C-3), 179,8 (C- IR (cm -1): 3409; 2924; 1760; 1598; 1457; 1266; 4), 161,6 (C-5), 100,1 (C-6), 166,5 (C-7), 94,9 1030. Ph ESI-MS ( m/z ) = 557 [M+Na] +. Ph (C-8), 159,0 (C-9), 105,2 (C-10), 107,9 (C-1’’), 1 H-NMR (C 5D5N; 500 MHz): 6,73 (1H, d, 88,4 (C-2’’), 77,2 (C-3’’), 87,9 (C-4’’), 62,5 J=1,5 Hz, H-2), 6,88 (1H, d, J=8 Hz, H-5), 6,69 (C-5’’), 101,3 (C-1’’’), 72,3 (C-2’’’), 72,2 (C- (1H, dd, J=2,0; 8,0 Hz, H-6), 6,98 (1H, d, J= 3’’’), 73,9 (C-4’’’), 70,5 (C-5’’’), 17,9 (C-6’’’). 2,0 Hz, H-2’), 7,52 (1H, d, J= 8,5 Hz, H-5’), Bng 1 . S li u ph 1H và 13 C-NMR (125 MHz) c a các hp ch t (1-3) 1a 2b 3c V trí H C H C H C (s H, b i, (ppm) ( s H, b i, J=Hz) (ppm) ( s H, b i, J=Hz) (ppm) J=Hz) ppm ppm ppm 1 122,8 121,9 122,7 2 8,07 (1H, s) 110,5 7,33 (1H, d, 2,0 ) 116,6 7,90 (1H, dd, 1,5; 7,0) 133,0 3 147,5 144,9 6,84 (1H, dd, 1,5; 7,0) 116,0 4 140,4 150,0 163,3 5 147,5 6,78 (1H, d, 8,0) 115,9 6,84 (1H, dd, 1,5; 7,0) 116,0 6 8,07 (1H, s) 110,5 7,28 (1H, dd, 2,0; 8,0) 121,7 7,90 (1H, dd, 1,5; 7,0) 133,0 COOH 169,6 167,4 170,1 Các ký hi u b i: s (singlet), d (doublet), dd (double of doublet). a b c : o trong C 5D5N; : o trong DMSO; : o trong CD 3OD
4. V. Đ. L ợi và nnk. / Tạp chí Khoa h ọc ĐHQGHN: Khoa h ọc Y D ược, T ập 32, S ố 1 (2016) 12-17 15 Xác định c ấu trúc c ủa các h ợp ch ất: acid 4-hydroxybenzoic sau khi phân tích d Ch t s 1 thu c d i d ng b t màu ki n ph nghi m và tham kh o các tài li u ã tr ng. Ph IR cho bi t trong phân t 1 có các công b [5]. nhóm ch c: nhóm OH (d i h p th có nh -1 -1 Ch t s 4 thu c d i d ng ch t r n màu 3496 cm ), nhóm carbonyl; C=O (1667 cm ), tr ng. Ph IR cho bi t trong phân t 4 có các liên k t C=C nhân th ơm (1610; 1541; 1425 cm - 1 -1 nhóm ch c sau: nhóm OH (d i h p th có nh ), liên k t C-O (1218; 1014 cm ). Ph kh i 3409 cm -1); nhóm C=O ( nh 1760 cm -1); liên ESI-MS có nh ion t i m/z: 169 [M-H] kt ôi C=C ( nh 1598; 1457 cm -1); liên k t C- (negative) cho bi t kh i l ng phân t c a 1 là -1 1 1 O ( nh 1266, 1030 cm ). Ph H-NMR xu t M=170. Ph H-NMR có tín hi u c a 02 proton hi n tín hi u c a 6 proton vòng th ơm có nhân th ơm xu t hi n d i d ng pic ơn 13 chuy n d ch t H 6,69 n 7,52 ppm, 3 tín hi u chuy n d ch H=8,07 ppm. Ph C-NMR xu t singlet c a c a nhóm methoxy ính vào vòng hi n tín hi u c a 05 carbon trong ó 04 carbon th ơm chuy n d ch l n l t H=3,78 ppm, có chuy n d ch n m trong chuy n d ch H=3,75 ppm và H=3,73, 4 proton methylen ca cacbon nhân th ơm ho c liên k t ôi C=C, chuy n d ch t 2,69 ppm n 3,03 ppm. Ph mt cacbon c a nhóm carbonyl. Các tín hi u 13 C-NMR c a 4 có 12 tín hi u carbon n m trong ca ph c ng h ng t h t nhân và ph kh i vùng liên k t ôi hay vòng th ơm có d ch cho bi t, ch t s 1 là h p ch t phenolic ơn chuy n t 112,7 ppm n 150,1 ppm kh ng gi n có m t vòng benzen v i b n nhóm th nh ch t s 4 có 2 vòng th ơm trong phân t . trong c u trúc [5]. Hai proton c a nhân th ơm Mt tín hi u cacbon c a nhóm carbonyl xu t nm hai v trí i x ng. Nhóm th th nh t hi n t i c=178,9 ppm, tín hi u này k t h p v i c xác nh là nhóm th carboxyl (C=O; d li u ph h ng ngo i có nh h p th t i 1760 -1 H=169,6 ppm), ba nhóm th còn l i c xác cm cho phép xác nh 4 có vòng lacton. Các nh là nhóm th hydroxy thông qua ph kh i. d li u ã phân tích trên r t gi ng v i nh ng Da vào t t c các d li u ph , tham kh o tài d li u ph c a h p ch t arctigenin [6, 7] d li u [4], [5] nh n danh h p ch t 1 là acid 3,4,5- oán c u trúc 4 có ph n aglycon là arctigenin. trihydroxybenzoic, tên th ng g i là acid gallic. Ph n ng c a 4 c xác nh là ng Ch t s 2 thu c d i dng b t màu nâu. glucose, c u hình β v i các tín hi u c tr ng 1 13 Các ph H-NMR; C-NMR và ph kh i cho proton anomer H= 5,61 (d, J=7,0 Hz), tín hi u bi t ch t s 2 c ng là m t acid phenolic ơn CH 2 v i H= 4,35-4,49 ppm, c=62,3 ppm. Ph gi n. Tuy nhiên, khác v i h p ch t 1, ch t s 2 kh i có pic ion ( m/z ) = 557 [M+Na] + cho bi t ch t có ba nhóm th trong vòng benzen trong ó có s 4 có kh i l ng phân t M=534. K t h p tính mt nhóm carboxyl và hai nhóm hydroxy. Ba ch t v t lý, d ki n ph và tham kh o tài li u [6], tín hi u proton c a 2 xu t hi n d i d ng ABX [7], [8] nh n danh ch t s 4 là arctiin. các chuy n d ch 7,33 (1H, d, 2,0 Hz; H-2); Ch t s 5 thu c d i d ng b t màu vàng. Ph IR cho bi t trong phân t c a h p 6,78 (1H, d, 8,0 Hz; H-5); 7,28 (1H, dd, 2,0; 8,0 ch t 5 có các nhóm OH (3402 cm -1), nhóm C=O Hz; H-6). Tham kh o tài li u [5], xác nh ch t (1659 cm -1), nhóm C=C nhân th ơm (1614; 1512 s 2 là h p ch t acid 3,4-dihydroxybenzoic, tên cm -1), nhóm C-O (1183, 1090 cm -1). Ph 1H- th ng g i acid protocatechuic. NMR c a 5 xu t hi n tín hi u c a 6 proton Gi ng nh ch t s 1 và ch t s 2, ch t s 3 vòng th ơm chuy n d ch H 6,21-7,98 ppm. cng là d n xu t c a acid benzoic. Ch t s 3 có Trong s 6 proton này có 2 proton ghép c p hai nhóm tín hi u proton c a nhân th ơm (m i meta H 6,21 (1H, d, J=2 Hz); 6,41 (1H, br s), nhóm có 2 proton i x ng). Hai nhóm proton 2 tín hi u c p doublet kép c a 4 proton th ơm: này c xác nh là các proton H-2; H-6 và H- H 6,95 (2H, dd, J=2,0; 7,0 Hz) và H 7,98 (2H, 3; H-5 c a vòng benzen. D a vào các ph dd, J=2,0; 6,5 Hz). Quan sát v vùng tr ng cao NMR, ph kh i cho bi t công th c phân t c a th y tín hi u c a hai nhóm CH v i H 5,70 (1H, 3 là C H O (ph kh i ESI-MS có nh ion t i br s) và 4,97 (1H, d, J=1,5) cùng m t nhóm các 7 6 3 tín hi u chuy n d ch t 1,25 n 4,41 m/z: 137 [M-H]). H p ch t 3 c xác nh là H ppm c nh n nh là tín hi u c a ph n
5. 16 V. Đ. L ợi và nnk. / Tạp chí Khoa h ọc ĐHQGHN: Khoa h ọc Y Dược, T ập 32, S ố 1 (2016) 12-17 13 ng. Kh o sát ph C-NMR ch ra s có m t C-3 do xu t hi n t ơ ng tác c a H-1’’ ( H 5,70, ca 26 nguyên t carbon, trong ó tín hi u c a br s) và C-3 ( C 134,8 ppm) khi quan sát trên nhóm C=O xu t hi n C 179,8 ppm. T t c ph HMBC. Các tín hi u cacbon còn l i c a các d li u trên cho bi t ch t s 5 là m t ng arabinofuranose c xác nh là 88,4 flavonoid diglycosid, phù h p v i ph ESI-MS (C-2’’), 77,2 (C-3’’), 87,9 (C-4’’), 62,5 (C-5’’) pic ion m/z 587 [M+Na] + cho bi t công th c sau khi phân tích các ph HSQC, HMBC c ng phân t C 26H28 O14 (M=564) [2], [9]. Xét riêng nh tham kh o tài li u ã công b [2], [9]. ph n aglycon, vi c ch có các tín hi u proton và ng rhamnopyranose c xác nh là ính carbon th ơm (ho c thu c liên k t ôi) ch ng t vào v trí C-2 c a ng arabinose do xu t hi n hp ch t 5 là flavonoid v i ph n aglycon ch có tơ ng tác c a H-1’’’ ( H 4,97, d) và C-2’’’ ( C nhóm th hydroxy. Các tín hi u proton thu c v 88,4 ppm) c ng nh tơ ng tác c a H-2’’ ( H trí meta cho bi t chúng thu c v trí 6 và 8 c a 4,44, dd) và C-1’’’ ( C 101,3 ppm) trên ph vòng A, 2 tín hi u c p doublet kép c a 4 proton HMBC. T ng h p các d ki n ph ã phân tích, th ơm c xác nh hai c p proton v trí tham kh o tài li u [2], [9], [10] xác nh ch t s ortho i x ng c a vòng B. Do ó ph n 5 là h p ch t kaempferol-3-O--L- aglycon c xác nh là kaempferol [2]. Hai rhamnopyranosyl(1 2)-α-L-arabinofuranosid. ph n ng trong phân t c a 5 u là ng Hp ch t này l n u tiên c phân l p t lá có c u hình α do 2 proton anomer xu t hi n ca loài Artabotrys hexapetalus thu hái H 5,70 (1H, br s) và 4,97 (1H, d, J=1,5). Hai Trung Qu c [10]. Cho n nay, ch a có b t ph n ng l n l t c xác nh là c nghiên c u nào công b v s có m t c a arabinofuranose và rhamnopyranose (m t hp ch t kaempferol-3-O-α-L- ng có 5 carbon và m t ng có 6 carbon). rhamnopyranosyl(1 2)-α-L-arabinofuranosid ng arabinose ính vào ph n aglycon v trí trong các loài thu c chi Leea . h Hình 1. Công th c c u t o c a các h p ch t ( 1-5) phân l p c t lá g i h c. 4. Kt lu n tích các d ki n ph và so sánh v i nh ng tài li u ã công b , các h p ch t này c xác nh T c n chi t ethanol b ph n lá c a cây g i là acid gallic ( 1), acid protocatechuic ( 2), acid hc ( Leea rubra Blume ex Spreng) thu hái 4-hydroxybenzoic ( 3), arctiin ( 4), kaempferol- Bc Giang (Vi t Nam), b ng các ph ơ ng pháp 3-O-α-L-rhamnopyranosyl(1 2)-α-L- sc ký, nhóm nghiên c u ã phân l p và xác arabinofuranosid ( 5). Ba h p ch t 2, 4, 5 l n nh c u trúc c a 05 h p ch t phenolic. Phân u tiên phân l p c t loài g i h c L. rubra , trong ó hai h p ch t ( 4-5) l n u tiên c
6. V. Đ. L ợi và nnk. / Tạp chí Khoa h ọc ĐHQGHN: Khoa h ọc Y D ược, T ập 32, S ố 1 (2016) 12-17 17 tìm th y trong m t loài thu c chi Leea. ây là [4] Gangadhar M. et al, Isolation and óng góp m i c a nghiên c u nh m làm phong characterisation of gallic acid from Terminalia phú thêm tri th c v hóa th c v t h c c a chi bellerica and its effect on carbohydrate Leea nói chung và loài L. rubra nói riêng. regulatory system in vitro, International c k t trên ng m ra nh ng h ng Journal of Research in Ayurveda and nghiên c u sâu h ơn nh m t i c tiêu m ra Pharmacy, 2(2) (2011) 559. t ch t nh nng ng ng m ch t [5] Yu Y, Gao H, Tang Z. et al., Several phenolic acids from the fruit of Capparis spinosa, Asian chu n trong ki m nghi m. Cn ti p c th c Journal of Traditional Medicines, 1, (2006) 1. hi n c nghiên c u b sung v m l ng [6] Xie L.H. et al., Transformation of arctiin to c ng sinh c a c h p ch t phân l p estrogenic and antiestrogenic substances by c, nh m minh ch ng cho công ng p human intestinal bacteria, Chemical and ph n xây d ng h th ng tiêu , ph ơ ng p Pharmaceutical Bulletin51(4) (2003) 378. nh nh, nh l ng c cho công c [7] Saknali A. et al., Sausurea heteromalla (D. Don) Hand.-Mazz.: A new source of arctiin, n ch t l ng d c li u g i c. arctigenin, and chlorojanerin, Indian Journal of Chemistry, 50 (2011) 624. Tài li u tham kh o [8] Chaturvedula VSP. et al., Chemical constituents from the polar fraction of Rubus suavissimus, organic chemistry current [1] Vi n D c li u, Cây thu c và ng v t làm research, 1(1) (2012) 1. thu c Vi t Nam, Nhà xu t b n Khoa h c và [9] Zhong J, Yang Y, Xiao Z, Separation and K thu t, t p 1 (2004) 874. purification of three flavonoids from the petal of [2] Nguy n Th Ph ơ ng và c ng s , Flavonoid Rosa Rugosa Thunb. by HSCCC, Asian Journal of phân l p t lá c a cây g i h c, T p chí D c Traditional Medicines, 4(6) (2009) 220. li u, 19(2) (2014) 110. [10] Li T, Yu J, Studies on the chemical constituents of [3] Phuong NT. et al, Triterpenes from the leaves of the leaves from Artabotrys hexapetalus, Yao Xue Leea rubra Blume ex Spreng, Vietnam Journal of Xue Bao, 33(8) (1998) 591. Medicinal Materials, 19(5) (2014) 307. Extraction and Separation of Various Compounds from Leaf of Leea Rubra Blume ex Spreng Vu Duc Loi 1, Pham Giang Nam 1, Hoang Van Hung 1, Nguyen Thi Phuong 2 1VNU School of Medicine and Pharmacy, 144 Xuan Thuy St., Cau Giay Dist., Hanoi, Vietnam 2National Institute of Medicinal Materials, 3B Quang Trung St, Hoan Kiem Dist, Hanoi, Vietnam Abstract: From a 96% ethanol extract derived from leaf of Leea rubra Blume ex Spreng collected in Lang Giang (Bac Giang Province, Vietnam), five compounds ( 1-5) were separated by liquid chromatography. These compounds were identified to include gallic acid ( 1), protocatechuic acid (2), 4-hydroxybenzoic acid ( 3), arctiine ( 4) and kaempferol-3-O-α-L-rhamnopyranosyl(1 2)-α-L- arabinofuranoside ( 5) based on the comparison between their spectrophotometric data with the previously published database. All the above-mentioned compounds were sucessfully isolated from Leea rubra Blume ex Spreng. Among them, three compounds 2, 4 and 5 were first time obtained from this plant species, particularly compounds 4 and 5 were also first time reported for the genus Leea . Keywords: Gallic acid, protocatechuic acid, 4-hydroxybenzoic acid, arctiine, kaempferol-3-O-α- L-rhamnopyranosyl(1 2)-α-L-arabinofuranoside.