Giáo trình Công nghệ di truyền - Chương 5: Cải biến và đột biến - Nguyễn Vũ Phong
Bạn đang xem tài liệu "Giáo trình Công nghệ di truyền - Chương 5: Cải biến và đột biến - Nguyễn Vũ Phong", để tải tài liệu gốc về máy bạn click vào nút DOWNLOAD ở trên
Tài liệu đính kèm:
- giao_trinh_cong_nghe_di_truyen_chuong_5_cai_bien_va_dot_bien.pdf
Nội dung text: Giáo trình Công nghệ di truyền - Chương 5: Cải biến và đột biến - Nguyễn Vũ Phong
- Cải biến và đột biến
- Nhằm • Xác định promotor hoặc các trình tự điều hòa • Xác định cấu trúc sơ cấp và thứ cấp của protein quyết định đến hoạt động của nó • Di truyền ngược: biến đổi kiểu gene xem xét, đánh giá sự ảnh hưởng đến kiểu hình.
- Phương pháp • Dựa trên enzyme cắt giới hạn – Loại bỏ trình tự nhận biết đặc thù của RE – Đưa vào trình tự nhận biết – Xen đoạn – Làm mất đoạn • Đột biến định hướng bằng oligonucleotide – Không dùng PCR – Dùng PCR
- Loại bỏ trình tự nhận biết của RE
- Đột biến định hướng
- Đột biến định hướng bằng PCR, megaprimer
- Đột biến định hướng bằng PCR
- Đột biến bằng overlap PCR
- Đột biến bằng overlap PCR
- Bất hoạt gene • Giúp khám phá vai trò sinh lý của gene • Điều khiển sự biểu hiện một gene đột biến • Bất hoạt một gen không mong muốn • Phương pháp: – Làm gián đoạn cấu trúc gene – Kìm hãm sự biểu hiện của gene
- Gián đoạn cấu trúc gene
- Gián đoạn cấu trúc gene (cont.)
- Làm câm lặng gene sau phiên mã (Post-transcriptional gene silencing, PTGS) • Antisense RNA: RNA sợi đơn, được đưa vào trong tế bào nhằm ức chế bộ máy phiên mã thông qua sự bắt cặp bổ sung với mRNA của gen mục tiêu.
- Làm câm lặng gene sau phiên mã (Post-transcriptional gene silencing, PTGS) • RNA interference